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在無菌生產(chǎn)工藝中，為了對無菌生產(chǎn)區(qū)域環(huán)境和微生物進行一個有效的控制，需要選擇合適的消毒方式，空間消毒的方式有紫外線照射，甲醛、環(huán)氧乙烷等氣體進行熏蒸。但是常規(guī)的消毒滅菌方法有諸多的缺點，如紫外線照射法，紫外燈的照射強度會隨使用時間的延長而衰減，什么時候達不到消毒要求我們不得面知，紫外線穿透率較弱，并且有死角，環(huán)境濕度對消毒效果影響較大，采用熏蒸，消毒周期長，空調系統(tǒng)需要長時間運行，能耗增加并且還存在二次污染的問題。臭氧消毒方式與上文消毒方式相比有以下優(yōu)點，臭氧消毒以空氣或水為原料，不需要其它成分引入，并且消毒擴散均勻，不存在消毒死角，消毒快速。臭氧消毒后會分解成氧氣，所以臭氧消毒也稱之為綠色消毒。省去了消毒后的二次清潔。

潔凈區(qū)臭氧消毒是利用HVAC系統(tǒng)的循環(huán)風作為臭氧的載體，將臭氧發(fā)生器生產(chǎn)的臭氧由HVAC系統(tǒng)中的風機產(chǎn)生的壓力風源，擴散至整個潔凈區(qū)域，并使空氣中的臭氧濃度均勻分布，即可達到滅菌的目的。

臭氧對空氣中的微生物有明顯的殺滅作用，采用20mg/m3濃度的臭氧，作用30min，對自然菌的殺滅率達到90%以上。用臭氧消毒空氣，必須是在封閉空間，且室內無人條件下進行，消毒后至少經(jīng)過30min才能進入，保證臭氧已經(jīng)全部被降解，或濃度已降至不會對人員產(chǎn)生傷害的程度。這種消毒方式可用于手術室，病房，工廠潔凈生產(chǎn)車間等場所的空氣消毒。臭氧對物品表面上污染的微生物有殺滅作用，用臭氧氣體進行表面消毒，但作用緩慢，一般要求60mg/m3，相對濕度≥70%，作用60min～120min才能達到消毒效果。（摘自《消毒技術規(guī)范》）。

在潔凈區(qū)臭氧消毒效果的驗證前提是應先確認和校準的臭氧發(fā)生器技術指標是否滿足消毒的要求，主要指標的有臭氧產(chǎn)量、臭氧濃度和時間定時器等。并通過最終檢查細菌數(shù)、環(huán)境微生物水平、消毒時的濃度來確定消毒效果。

臭氧發(fā)生器的選擇，根據(jù)潔凈室的體積和HVAC系統(tǒng)的風管體積(或風量)、臭氧殺菌效率選用相應的臭氧發(fā)生器。可將發(fā)生器主機置于空調系統(tǒng)的總送風管或回風管道的合適位置，電源控制系設置于機房內。消毒時關閉相應的新風進口和回風排放閥門，使整個被消毒的潔凈區(qū)空氣通過凈化系統(tǒng)風管形成內循環(huán)。

臭氧消毒代替民前采用化學試劑熏蒸對物體表面、墻壁、地面及設備表面的消毒，其優(yōu)點是在被消毒的房間里不需增加任何消毒設備，即可達到規(guī)范標準的要求，保持良好的工作環(huán)境，也可直接安裝在空氣處理設備中，使臭氧發(fā)生器的安裝與維護變得更為簡單和方便。

臭氧發(fā)生器消毒的計算，在設計臭氧消毒程序時，常依托于空調系統(tǒng)的運行將臭氧送入潔凈室內部，考慮臭氧濃度時，應針對消毒空間體積、空調系統(tǒng)總送風量、空調系統(tǒng)新風量、空調系統(tǒng)排風（含滲透風、泄漏風等）等參數(shù)綜合計算，然后選擇合適的臭氧發(fā)生器，并進行安裝調試、確認之后投入使用。

經(jīng)驗公式

以選擇合適的臭氧發(fā)生器為前提，假設潔凈室(區(qū))體積為V1，HVAC系統(tǒng)風管容積為V2，

保持潔凈區(qū)正壓所補充的新風的臭氧消耗量為V3，V3的確定根據(jù)消毒實踐。

則消毒空間體積為：V＝V1+V2+V3

依據(jù)分式我們可歸納出較為可靠的經(jīng)驗公式如下：

V＝HVAC系統(tǒng)循環(huán)總風量(m3／h)×25％(假定新風補充量為25％)×10％(保持潔凈區(qū)

正壓需補充的新風量)×37.75％(計算應用臭氧半衰率的預算值)

即：V≈循環(huán)系統(tǒng)總風量×0.944％

臭氧濃度的確認選取以下房間作為擬測試消毒濃度的房間：凈化空調潔凈送風最遠端的房間、換氣次數(shù)最低的房間、關鍵工藝房間等。消毒過程中，使用便攜式臭氧濃度檢測儀對以上房間進行臭氧濃度的監(jiān)測。消毒過程中，各房間臭氧濃度應符合消毒操作規(guī)程中規(guī)定的臭氧消毒濃度?？紤]到臭氧對人體健康方面的副作用，推薦安裝在線臭氧濃度檢測儀，對消毒狀況進行監(jiān)測。此情況下，可直接通過在線臭氧濃度監(jiān)測儀獲取相關參數(shù)。生物指示劑挑戰(zhàn)性試驗在對目標區(qū)域執(zhí)行臭氧消毒前，可將含菌量為1*103cfu/片的枯草芽孢桿菌生物指示劑放置于空白培養(yǎng)皿（或其他合適的承載容器）內，將培養(yǎng)皿置于被測試臭氧濃度的房間內，打開培養(yǎng)皿蓋子，使生物指示劑完全暴露在環(huán)境中，以便于臭氧消毒過程中能夠作用到生物指示劑上。在臭氧消毒結束后，回收生物指示劑，按照生物指示劑的培養(yǎng)要求進行培養(yǎng)。

培養(yǎng)結朿后對目標生物指示劑進行活菌培養(yǎng)計數(shù)，如每個測試點的殺滅對數(shù)值均>3.00，判定為臭氧消毒合格。臭氧殘留的確認臭氧消毒結束，通過指定時間新風置換后，潔凈室內的臭氧濃度不得高于0.1ppm(約0.20mg/m3)。

行業(yè)內也有的做法是，在消毒全過程，實施臭氧濃度檢測，當室內空氣濃度達到要求了，開始計時保持60min，消毒結束，進行空氣置換后，進行環(huán)境微生物的檢測，就是對潔凈區(qū)的沉降菌、浮游菌檢測，檢測結果應符合相應潔凈級別對環(huán)境微生物水平的要求。這算是一種間接證明環(huán)境已經(jīng)符合要求的手段。

考慮到人員安全，在臭氧消毒時應注保證人員全部撤離消毒區(qū)域，控制出入口，采取張貼消毒標志等適當?shù)姆绞竭M行的控制。應制定相應的應急預案，假如發(fā)生人員傷害事件，按應急預案處理。